इष्टतम कोशिका वृद्धि और प्रयोगात्मक परिणाम सुनिश्चित करने के लिए सही कल्चरवेयर चुनना महत्वपूर्ण है। सेल कल्चर वाहिकाओं का चयन करते समय, सेल प्रकार, आपके कल्चर का विशिष्ट उद्देश्य, कल्चर का पैमाना, कल्चर माध्यम का प्रकार, वाहिकाओं की सामग्री और आकार, सतह के उपचार, उचित ढक्कन जैसे कारकों पर विचार करना महत्वपूर्ण है। गैस विनिमय, और आपके प्रयोगशाला उपकरणों के साथ उनकी अनुकूलता।
सही सेल कल्चर वेसल का चयन करते समय विचार करने योग्य प्रमुख कारक यहां दिए गए हैं
1. कोशिकाओं के प्रकार के आधार पर कोशिका संवर्धन पोत चुनें
अनुवर्ती कोशिकाएँ
इन कोशिकाओं को जुड़ने और फैलने के लिए एक सतह की आवश्यकता होती है। अनुगामी कोशिकाओं के लिए, आपको ऐसे सतह क्षेत्र वाले जहाजों की आवश्यकता होगी जो कोशिका के जुड़ाव और विकास के लिए पर्याप्त स्थान प्रदान करें।
उदाहरण टिशू कल्चर-उपचारित फ्लास्क, पेट्री डिश और मल्टी-वेल प्लेटें।
सस्पेंशन सेल
ये कोशिकाएँ माध्यम में तैरती हुई बढ़ती हैं, इसलिए सतह पर विचार नहीं किया जाता है।
उदाहरण
टिशू कल्चर फ्लास्क, स्पिनर फ्लास्क, या बड़े पैमाने पर निलंबन संस्कृतियों के लिए बायोरिएक्टर।
2. आकार (वॉल्यूम क्षमता) के आधार पर सेल कल्चर वेसल चुनें
छोटे पैमाने की संस्कृतियाँ
छोटे पैमाने के प्रयोगों या उच्च-थ्रूपुट स्क्रीनिंग के लिए, छोटे बर्तन आदर्श होते हैं।
उदाहरण मल्टी-वेल प्लेट्स (6, 24, 96-सेल कल्चर प्लेट्स),
पेट्री डिश, या T25 फ्लास्क।
बड़े पैमाने की संस्कृतियाँ
यदि आपको बड़ी मात्रा में कोशिकाएं विकसित करने की आवश्यकता है, तो बड़े बर्तन या बायोरिएक्टर बेहतर हैं।
सस्पेंशन सेल कल्चर के लिए उदाहरण T75 और T175 सेल कल्चर फ्लास्क, बायोरिएक्टर, या स्पिनर फ्लास्क।
3. सतह के उपचार के आधार पर सेल कल्चर पोत चुनें
टिशू कल्चर-उपचारित सतहें
कोशिका जुड़ाव को बढ़ावा देने के लिए वाहिकाओं का पूर्व-उपचार किया जाता है, जिससे वे अनुवर्ती कोशिका प्रकारों के लिए उपयुक्त हो जाते हैं। ये आम तौर पर कोलेजन, फ़ाइब्रोनेक्टिन, या अन्य बाह्य मैट्रिक्स घटकों जैसे पदार्थों से लेपित होते हैं।
गैर-उपचारित सतहें
निलंबन संस्कृतियों के लिए आदर्श या जब कोशिकाओं को सतह पर चिपकने की आवश्यकता नहीं होती है। इनका उपयोग आम तौर पर उन कोशिकाओं के लिए किया जाता है जो माध्यम में स्वतंत्र रूप से बढ़ती हैं।
4. सामग्री के आधार पर सेल कल्चर वेसल चुनें
पॉलीस्टाइरीन आमतौर पर मानक सेल कल्चर अनुप्रयोगों के लिए उपयोग किया जाता है। यह स्पष्ट है, आसान दृश्य निरीक्षण की अनुमति देता है, और अनुवर्ती और निलंबन कोशिकाओं दोनों के लिए अच्छा काम करता है।
पॉलीकार्बोनेट या पॉलीप्रोपाइलीन का उपयोग कुछ बायोरिएक्टर अनुप्रयोगों और अधिक लचीलेपन या विशिष्ट सतह उपचार की आवश्यकता वाले जहाजों के लिए किया जाता है।
लागत और टूटने की क्षमता के कारण मानक ऊतक संवर्धन के लिए उपयोग किए जाने वाले कांच के बर्तन विशिष्ट अनुप्रयोगों या बड़े पैमाने पर संवर्धन के लिए उपयुक्त हो सकते हैं।
बोतल
सामान्य कोशिका संवर्धन के लिए, आमतौर पर टी-फ्लास्क (टी25, टी75, टी150) का उपयोग किया जाता है। सपाट सतह कोशिका के जुड़ाव और विकास के लिए एक अच्छा क्षेत्र प्रदान करती है। यदि उपयुक्त स्थितियाँ बनी रहती हैं तो उनका उपयोग अनुवर्ती कोशिकाओं और निलंबन संस्कृतियों दोनों के लिए किया जा सकता है।
पेट्री डिश
छोटे पैमाने की संस्कृतियों और उन प्रयोगों के लिए आम है जिनके लिए अवलोकन की आवश्यकता होती है, जैसे कॉलोनी गठन परख।
मल्टी-वेल प्लेट्स
ये उच्च-थ्रूपुट स्क्रीनिंग और छोटे पैमाने के प्रयोगों के लिए उपयोगी हैं। 6, 12, 24, 48, वाली प्लेटें
96, या 384 कुएं उपलब्ध हैं, और सेल-आधारित परख, साइटोकिन रिलीज, दवा परीक्षण और अन्य उच्च-थ्रूपुट अनुप्रयोगों के लिए आदर्श हैं।
स्पिनर फ्लास्क
सस्पेंशन सेल कल्चर के लिए उपयोग किया जाता है, विशेष रूप से बड़ी मात्रा में जहां सेल विकास को बनाए रखने और सेल क्लंपिंग से बचने के लिए नियंत्रित आंदोलन आवश्यक है।
बायोरिएक्टर
बड़े पैमाने पर निलंबन संस्कृति के लिए, बायोरिएक्टर पर्यावरणीय स्थितियों (जैसे, पीएच, तापमान, ऑक्सीजनेशन) पर अधिक जटिल नियंत्रण की अनुमति देते हैं और बड़ी मात्रा में उत्पादन के लिए उपयोग किए जाते हैं, जैसे बायोफार्मास्युटिकल विनिर्माण में।
6. बाँझपन और वेंटिलेशन के आधार पर सेल कल्चर वेसल चुनें
बाँझपन
सुनिश्चित करें कि संदूषण से बचने के लिए बर्तन रोगाणुरहित है या रोगाणुरहित किया गया है। अधिकांश वाणिज्यिक संस्कृति बर्तन पूर्व-निष्फल होते हैं, लेकिन हमेशा पैकेजिंग की जांच करें।
वेंटिलेशन
कुछ बर्तन, जैसे फ्लास्क, संदूषण को रोकने के साथ-साथ हवा के आदान-प्रदान की अनुमति देने के लिए हवादार ढक्कन या फिल्टर के साथ आते हैं। उच्च-घनत्व स्थितियों में कोशिकाओं का संवर्धन करते समय यह आवश्यक है।
7. उपयोग की सुविधा के आधार पर सेल कल्चर वेसल चुनें
ऑटोक्लेवेबल बनाम डिस्पोजेबल
कुछ कल्चर बर्तनों को पुन: उपयोग के लिए आटोक्लेव किया जा सकता है (उदाहरण के लिए, कांच की बोतलें, कुछ प्लास्टिक फ्लास्क), जबकि अन्य एकल-उपयोग और डिस्पोजेबल हैं (उदाहरण के लिए, प्लास्टिक पेट्री डिश, मल्टी-वेल प्लेट्स)।
हैंडलिंग और परिवहन
वाहिकाओं के बीच कोशिकाओं को स्थानांतरित करने में आसानी पर विचार करें। उदाहरण के लिए, मल्टी-वेल प्लेटों को स्वचालित पिपेटर्स जैसे उपकरणों के साथ आसान संचालन के लिए विशेष प्लेटों की आवश्यकता हो सकती है।
8. कल्चर मीडियम वॉल्यूम के आधार पर सेल कल्चर वेसल चुनें
ऐसा बर्तन चुनें जो संसाधनों को बर्बाद किए बिना संस्कृति माध्यम की वांछित मात्रा को समायोजित कर सके। यदि उच्च-मात्रा संस्कृति के साथ काम कर रहे हैं, तो बड़े फ्लास्क या बायोरिएक्टर आवश्यक हो सकते हैं, जबकि छोटी मात्रा सेल संस्कृति व्यंजन या प्लेटों के लिए उपयुक्त हैं।
9. लागत विचार के आधार पर सेल कल्चर पोत चुनें
डिस्पोजेबल बनाम पुन: प्रयोज्य
डिस्पोजेबल प्लास्टिक के बर्तन लागत प्रभावी हैं और संदूषण के जोखिम को कम करते हैं, लेकिन बड़े पैमाने के संचालन के लिए वे महंगे हो सकते हैं। पुन: प्रयोज्य कांच के बर्तनों की अग्रिम लागत अधिक होती है, लेकिन इन्हें कई बार कीटाणुरहित और पुन: उपयोग किया जा सकता है, जिससे वे दीर्घकालिक उपयोग के लिए अधिक किफायती हो जाते हैं।
वॉल्यूम दक्षता
सुनिश्चित करें कि सामग्री की बर्बादी से बचने के लिए बर्तन का आकार उचित है, खासकर जब महंगे विकास मीडिया या अभिकर्मकों का उपयोग किया जाता है।
10. विशिष्ट अनुप्रयोग आवश्यकताओं के आधार पर सेल कल्चर पोत चुनें
इमेजिंग
यदि आपको माइक्रोस्कोप के तहत कोशिकाओं को देखने की आवश्यकता है, तो अपने इमेजिंग सेटअप के लिए ऑप्टिकली स्पष्ट सामग्री और उचित आयाम वाले जहाजों का चयन करें (उदाहरण के लिए, उच्च सामग्री स्क्रीनिंग के लिए मल्टी-वेल प्लेट्स या लाइव-सेल इमेजिंग के लिए ग्लास-बॉटम डिश)।
नियंत्रित उत्तेजना
सस्पेंशन सेल कल्चर के लिए, स्पिनर फ्लास्क या बायोरिएक्टर पर विचार करें जो कोशिकाओं को समान रूप से निलंबित रखने के लिए नियंत्रित आंदोलन प्रदान करते हैं।
निष्कर्ष
सही सेल कल्चर वेसल को चुनने के लिए सेल प्रकार, कल्चर स्केल, सामग्री अनुकूलता और विशिष्ट प्रयोगात्मक आवश्यकताओं सहित कई कारकों को संतुलित करने की आवश्यकता होती है। अनुवर्ती कोशिकाओं को ऐसी सतहों की आवश्यकता होगी जो लगाव को बढ़ावा दें, जबकि निलंबन कोशिकाओं को बड़ी मात्रा और आंदोलन से लाभ होता है। छोटे पैमाने के काम के लिए, मल्टी-वेल प्लेट या टी-फ्लास्क पर्याप्त हो सकते हैं, जबकि बड़ी संस्कृतियों के लिए स्पिनर फ्लास्क या बायोरिएक्टर की आवश्यकता हो सकती है। हमेशा सुनिश्चित करें कि जहाज आपकी बाँझपन और हैंडलिंग आवश्यकताओं को पूरा करते हैं, और आपके उपयोग के आधार पर लागत-प्रभावशीलता पर विचार करें।
इन कारकों पर विचार करके, आप इष्टतम पोत का चयन कर सकते हैं जो आपके सेल संस्कृति और प्रयोगात्मक लक्ष्यों के लिए सही स्थिति प्रदान करता है।