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सेल कल्चर लाल रक्त कोशिकाओं को पहले क्यों निकालता है?

2022-12-23

मूल परिचय
लाल रक्त कोशिकाओं को हटाने के लिए एरिथ्रोसाइट लाइसेट सबसे सरल और आसान तरीकों में से एक है, यानी लाल रक्त कोशिकाओं को लाइसैट से विभाजित करना, जो न्यूक्लियेटेड कोशिकाओं को नुकसान नहीं पहुंचाता है और लाल रक्त कोशिकाओं को पूरी तरह से हटा सकता है। Lysate दरार एक हल्के लाल रक्त कोशिका हटाने की विधि है, जिसका उपयोग मुख्य रूप से एंजाइम पाचन, लिम्फोसाइटों के पृथक्करण और शुद्धिकरण, और ऊतक प्रोटीन और न्यूक्लिक के प्रयोगों में लाल रक्त कोशिकाओं को हटाने के लिए छितरी हुई ऊतक कोशिकाओं के पृथक्करण और शुद्धिकरण के लिए किया जाता है। एसिड निष्कर्षण। लाल रक्त कोशिकाओं के lysate द्वारा प्राप्त ऊतक कोशिकाओं में लाल रक्त कोशिकाएं नहीं होती हैं, और इसका उपयोग प्राथमिक संस्कृति, कोशिका संलयन, प्रवाह साइटोमेट्री, न्यूक्लिक एसिड और प्रोटीन के पृथक्करण और निष्कर्षण आदि के लिए किया जा सकता है।

उपयोग के लिए निर्देश
ऊतक कोशिका का नमूना
1. ताजे ऊतकों को अग्न्याशय/एंजाइम या कोलेजनेज़ द्वारा पचाया गया और एकल कोशिका निलंबन में फैलाया गया, और सतह पर तैरनेवाला सेंट्रीफ्यूगेशन द्वारा त्याग दिया गया।

2. रेफ्रिजरेटर से 4 पर ELS लाइसेट लें, 1:3-5 के अनुपात में सेल अवक्षेप में ELS लाइसेट मिलाएं (3-5ml लाइसेट को 1ml सेल कॉम्पैक्ट में जोड़ें), धीरे से फेंटें और मिलाएं।

3. 5-8 मिनट के लिए 800-1000rpm पर सेंट्रीफ्यूज करें और ऊपरी लाल साफ तरल को त्याग दें।

4. अवक्षेपित भाग को एकत्र किया गया और 2-3 बार हैंक के घोल या सीरम-मुक्त कल्चर घोल के साथ सेंट्रीफ्यूज किया गया।

5, यदि क्रैकिंग पूर्ण/पूर्ण नहीं है तो चरण 2 और 3 को दोहराया जा सकता है।

6. बाद के प्रयोगों के लिए पुनर्निलंबन कोशिकाएं; यदि आरएनए निकाला जाता है, तो डीईपीसी पानी का उपयोग करके चरण 4 से तैयार किए गए समाधान में ऐसा करना सबसे अच्छा है

लाल रक्त कोशिकाओं का जीवन चक्र बहुत छोटा होता है, केवल 120 दिन, लेकिन वे बहुत जल्दी रक्त को पुन: उत्पन्न करते हैं, और इस मामले में वे विशेष रूप से कोशिका विभाजन में सक्षम होते हैं, और वे सबसे तेजी से विभाजित होने वाली कोशिकाएं हैं, इसलिए यह कोशिका बहुत मूल्यवान है, इसलिए यह सेल कल्चर के लिए बहुत उपयोगी है। यह बहुत सरल है, इसमें कोई अंग नहीं है, केवल कोशिका झिल्ली और प्रोटीन हैं।

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