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एलिसा किट के कार्य क्या हैं?

2022-12-23

एलिसा किट एंटीजन या एंटीबॉडी के ठोस चरण और एंटीजन या एंटीबॉडी के एंजाइम लेबलिंग पर आधारित है। ठोस वाहक की सतह से बंधे एंटीजन या एंटीबॉडी अभी भी अपनी प्रतिरक्षात्मक गतिविधि को बरकरार रखते हैं, और एंटीजन या एंटीबॉडी लेबल वाला एंजाइम अपनी प्रतिरक्षात्मक गतिविधि और एंजाइम गतिविधि दोनों को बरकरार रखता है। निर्धारण के समय, परीक्षण के तहत नमूना (जिसमें एंटीबॉडी या एंटीजन को मापा जाता है) ठोस वाहक की सतह पर एंटीजन या एंटीबॉडी के साथ प्रतिक्रिया करता है। ठोस वाहक पर बनने वाले एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स को धोने से तरल में अन्य पदार्थों से अलग किया जाता है।

एंजाइम-लेबल वाले एंटीजन या एंटीबॉडी जोड़े जाते हैं, जो प्रतिक्रिया द्वारा ठोस वाहक को भी बांधते हैं। इस समय, ठोस चरण में एंजाइम की मात्रा नमूने में पदार्थ की मात्रा के अनुपात में होती है। एंजाइम प्रतिक्रिया के सब्सट्रेट को जोड़ने के बाद, रंगीन उत्पाद बनने के लिए एंजाइम द्वारा सब्सट्रेट को उत्प्रेरित किया जाता है। उत्पाद की मात्रा सीधे नमूने में परीक्षण किए गए पदार्थ की मात्रा से संबंधित है, इसलिए रंग की गहराई के अनुसार गुणात्मक या मात्रात्मक विश्लेषण किया जा सकता है।

एंजाइमों की उच्च उत्प्रेरक दक्षता अप्रत्यक्ष रूप से प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के परिणामों को बढ़ाती है, जिससे परख अत्यधिक संवेदनशील हो जाती है। एलिसा का उपयोग एंटीजन निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है, लेकिन इसका उपयोग एंटीबॉडी निर्धारित करने के लिए भी किया जा सकता है।

एलिसा किट के मूल सिद्धांत
यह वस्तु को एंजाइम से जोड़ने के लिए एंटीजन और एंटीबॉडी की विशिष्ट प्रतिक्रिया का उपयोग करता है, और फिर मात्रात्मक निर्धारण के लिए एंजाइम और सब्सट्रेट के बीच रंग प्रतिक्रिया पैदा करता है। माप की वस्तु एंटीबॉडी या एंटीजन हो सकती है।

निर्धारण की इस विधि में आवश्यक तीन अभिकर्मक हैं:
â ठोस चरण प्रतिजन या एंटीबॉडी (प्रतिरक्षा अधिशोषक)
â¡ एंजाइम लेबल एंटीजन या एंटीबॉडी (मार्कर)
एंजाइम क्रिया के लिए ¢ सब्सट्रेट (रंग विकास एजेंट)

माप में, एंटीजन (एंटीबॉडी) पहले ठोस वाहक से बंधा होता है, लेकिन फिर भी अपनी प्रतिरक्षा गतिविधि को बरकरार रखता है, और फिर एंटीबॉडी (एंटीजन) और एंजाइम का एक संयुग्म (मार्कर) जोड़ा जाता है, जो अभी भी अपनी मूल प्रतिरक्षा गतिविधि और एंजाइम को बरकरार रखता है। गतिविधि। जब संयुग्म ठोस वाहक पर एंटीजन (एंटीबॉडी) के साथ प्रतिक्रिया करता है, तो एंजाइम का संबंधित सब्सट्रेट जोड़ा जाता है। यानी कैटेलिटिक हाइड्रोलिसिस या REDOX प्रतिक्रिया और रंग।

यह जो रंग पैदा करता है वह मापे जाने वाले एंटीजन (एंटीबॉडी) की मात्रा के समानुपाती होता है। इस रंगीन उत्पाद को नग्न आंखों, ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप, इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप द्वारा देखा जा सकता है, इसे स्पेक्ट्रोफोटोमीटर (एंजाइम लेबल इंस्ट्रूमेंट) द्वारा भी मापा जा सकता है। विधि सरल, सुविधाजनक, तेज और विशिष्ट है।

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